Etablierung einer qualitativen und quantitativen PCR-Methode zum Nachweis des Virus des Porcinen Reproduktions- und Respirationssyndroms (PRRSV) im Ejakulat von Zuchtebern

Innerhalb des Projektes soll eine neue ¿large scale'-Methode zur zuverlässigen Quantifizierung von RNA-Virusmaterial aus Sperma mittels Reverse Transkription (RT)-Real-time PCR unter Verwendung fluorogener Hybridisierungssonden entwickelt werden. Die beabsichtigte Virus-Quantifizierung im Ejakulat macht eine Adaptierung herkömmlicher RNA-Isolierungstechniken notwendig, da herkömmliche RNA-Isolierungsverfahren keine qualitativ hochwertige und zuverlässig quantifizierbare Virus-RNA liefern (Applied Biosystems, persönliche Mitteilung). Die am Markt erhältlichen RNA-Isolierungskits sollen für eine Virus-RNA-Isolierung aus Schweineejakulat adaptiert werden. Die am Institut bestehende Expertise auf dem Gebiet der Quantitativen Real-Time PCR (z.B. Steinborn et al. 2000 Nat. Genet. 25: 255; Schinogl et al. 2001 J. Forensic Sci. 122: 197) soll dabei auf den qualitativen und quantitativen 1-Schritt-Nachweis von Virusmaterial aller möglichen europäischen und amerikanischen PRRSV-Stämme erweitert werden.

Zentrum für Biologische Wissenschaften