Permeabilitätsmodulation an Endothelzellen

Auf Grundlage des Forschungsprojektes "Permeabilitätsmodulation an der Blut-Hirnschranke unter hypoxischen Bedingungen" wurden die geplanten, ergänzenden und weiterführende Untersuchungen zur Hemmung von posthypoxischen freien Radikalen sowie von deren Einfluß auf den Calciumstoffwechsel in humanen Endothelzellen durchgeführt. Weitere in-vivo und in-vitro Untersuchungen speziell im Hinblick auf die Verminderung bzw. Verhinderung der Bildung von freien Sauerstoffradikalen während Ischämie bzw. Hypoxie/Reperfusion, speziell bezüglich Dosis/Wirkungskurven und Wirkungszeiten des Radikalfängers im Hinblick auf die in-vitro-Effekte von Sauerstoffradikalfängern auf Radikalbildung und Calciumstoffwechsel in Endothelzellen konnten abgeklärt werden. Weiters wurden zur späteren Bestimmung von Veränderungen in der Signalübertragung mit Schwerpunkt auf Permeabilitätsmodulationen unter physiologischen und pathologischen Bedingungen bezüglich neuer Nachweismethoden Erfahrungen mit Western Blots an humanen Endothelzellen für "VASP" (vasodilator-stimulated phosphoprotein) und "CREB" (cAMP-responsive element binding protein) gewonnen. Mit diesen Techniken soll die Untersuchung der in Endothelzellen exprimierten Zona-occludens-assoziierten ("tight junction") Proteine (ZO-1, ZO-2, Occludin, Claudin-1) und damit auch die Auswirkung von Veränderungen in der Expression auf die Permeabilität des in-vitro Zellkulturmodells ermöglicht werden. Zur Überprüfung des Polymerisierungsgrades von zelleigenem Aktin in den die Gefäßpermeabilitat modulierenden Endothelzellen unter dem Einfluß verschiedener permeabilitätsfördender (freie Radikale) bzw. permeabilitätshemmender Substanzen (wie z.B. Melatonin, TEMPO) im Hinblick auf ihre Auswirkung auf die intra- und interzelluläre Permeabilität für verschieden Substanzen wurden Phalloidin-Aktinfärbungen getestet. Erste Ergebnisse dieser Testserie wiesen auf mögliche Ursachen der therapeutische Effekte von TEMPO hin.

Zentrum für Biologische Wissenschaften

NINDS, NIH, Stroke Branch
Funktion: Partner
Resusciative Medicine Department, Naval Medical Research Center
Funktion: Partner