Untersuchungen zur Plastizität viraler Hüllproteome

Kurzbezeichnung

Plastizität viraler Hüllproteome

Geldgeber

FWF Österreichischer Wissenschaftsfonds

Laufzeit

01.11.2012 - 31.10.2015

Abstract

Viele Virusarten tragen eine zusätzliche Hüllschicht aus Lipiden, die als Hülle oder "Envelope" bezeichnet wird, so zum Beispiel HIV und Influenza. Diese Hüllen beinhalten zumindest ein virales Glykoprotein und können auch zelluläre Menbranproteine enthalten. Wir konnten nachweisen, dass Proteine, die posttranslational mit Glykosylphosphatidylinositol(GPI)-ankern modifiziert worden sind, in gereinigter Form in die Lipidhüllen einiger Viren integrieren können, nachdem diese Viren die produzierenden Zellen verlassen haben. Für diese Studie stellen wir die Hypothese auf, dass solche Prozesse auch in einem natürlichen Kontext auftreten und Viren davon potentiell profitieren können (zum Beispiel durch Stabilisierung von Viruspartikeln oder eine Störung des Immunsystems). Wir planen die Assoziation von GPI-verankerten Proteinen an virale Hüllen zu untersuchen, aber in einem allgemeineren Ansatz auch die Anhaftung anderer Proteine nach dem Austritt der Viren aus den Zellen, z.B. im Blutkreislauf. Die Hypothese, dass Viren Proteine aus dem umgebenden Medium requirieren scheint schlüssig, und folglich sollte auch eine Änderung der assoziierten Proteine mit einer Änderung der Virusumgebung, (z.B. nach der Ausschleusung der Viren aus der Zelle, beim Wechsel der Umgebung innerhalb des Wirtes, bei Wirts- oder Wirtsspezieswechsel) einhergehen. Diese Vorgänge sollten eine bestimmte Plastizität der viralen Envelope-Proteome mit sich bringen. Bisher wurden keine Studien durchgeführt, die diese Mechanismen untersuchen, obwohl solche Vorgänge eine große Rolle bei der Übertragung von Viren spielen könnten. Drei unterschiedliche Forschungsfelder werden initiiert werden: In "Insertionsköder"-Versuchen wird ein Protein, von dem bekannt ist, dass es in virale Hüllen eingegliedert werden kann, verwendet um die Bedingungen, die eine solche Assoziation erlauben, speziell im Hinblick auf Art und Menge von Hintergrundprotein, Temperatur und Stabilität zu untersuchen. Im Forschungsfeld Assoziationsdynamikmonitoring werden Modellmembranen mit genau definierter Lipid und Proteinzusammensetzung hergestellt, um den Einfluß von unterschiedlichen Lipiden und Membranproteinen auf die Assoziation zu untersuchen. Im differentiellen Proteomikansatz, werden Virushüllen vor und nach der Exposition mit einer komplexen Proteinmischung z.B. Serum miteinander verglichen. Unterschiede in der Proteinzusammensetzung deuten auf Assoziations-/Insertionsvorgänge hin. Das Projekt wird in enger wissenschaftlicher Zusammenarbeit mit dem Department für Nanobiotechnologie der Universität für Bodenkultur (BOKU) in Wien - wodurch Expertise in Biophysik und Modellmembranen gewährleistet ist ¿ und dem Technologiekompetenzzentrum VetCore der Universität für Veterinärmedizin in Wien, wodurch Erfahrung und Methoden im Bereich Proteomik sichergestellt werden können, durchgeführt werden. Dadurch ist die optimale Kombination an Wissen garantiert um das Projekt ausführen zu können. Wenig ist darüber bekannt, wie Viren mit den Herausforderungen im Stadium zwischen infizierten Zellen umgehen. Wir sind der Meinung, dass die Informationen die während des Projektes gesammelt werden können, helfen werden einen neuen Aspekt von Wirt-Pathogen-Interaktionen zu definieren, da die untersuchten Mechanismen von großer Bedeutung für die Übertragung von Viren sein können. Letztlich können sich daraus auch neue Wege für antivirale Interventionen ergeben, gerade auch im Bereich von zoonotischen oder neu auftretenden viralen Infektionen.