Der quantitative Nachweis von Listerien in Milch und Milchprodukten mittels der Real-Time Quantitative PCR

Im Rahmen dieses Projektes wurde ein Real-Time Quantitative PCR-Assay zur Detektion und zur Zählung von Listeria monocytogenes und Listeria innocua entwickelt und zur Untersuchung von künstlich kontaminieren Milchproben eingesetzt. Als Zielsequenz wurde das iap-Gen verwendet, welches im Genom beider Spezies vorkommt. Die Untersuchung von 42 L. monocytogenes-Isolaten, 33 L. innocua-Isolaten und 33 Bakterienstämmen, die nicht dem Genus Listeria angehörten, zeigte die hohe Spezifität des Assays. Die Methode war durch einen weiten Bereich der linearen Quantifizierbarkeit und eine Nachweisgrenze von 6 Kopien des iap-Gens/PCR charakterisiert. Beim Einsatz zum direkten Nachweis und zur Quantifizierung von L. monocytogenes in Milch zeigte der Assay die gleiche Nachweisgrenze wie das Koch´sche Plattenverfahren. Die PCR-ermittelten Kopienzahlen des iap-Gens waren jedoch um ein bis zwei Zehnerpotenzen höher als die mit dem Koch´schen Plattenverfahren bestimmten KBE.

Zentrum für Lebensmittelwissenschaften und Öffentliches Veterinärwesen