Untersuchungen zur molekularen Grundlage der Cytadhärenz von Mycoplasma gallisepticum

Um die an der Etablierung einer Infektion von Mycoplasma gallisepticum beteiligten Cytadhäsine und deren Kofaktoren zu identifizieren, wurden mittels ¿Signature-tagged Transposon Mutagenesis¿ Mutanten der pathogenen Subpopulation Rlow des Stammes R hergestellt. Von diesen Mutanten konnten durch Vorscreenings in Kolonie-Immunoblots und Kolonie-Hämadsorptionstests sieben identifiziert werden, welche die Fähigkeit zur Expression der zwei phasenvariablen Cytadhäsine PvpA und GapA verloren hatten. Eingehendere Untersuchungen ergaben aber, dass nur die Mutante mHAD-3 die Fähigkeit zur Hämadsorption irreversibel verloren hatte. Bei dieser Mutante war das Tn4001tag tatsächlich in einem die Cytadhärenz vermittelnden Gen, nämlich dem crmA-Gen integriert, wodurch dieses und das gapA-Gen, die beide in einem Operon liegen, inaktiviert wurden. Darüber hinaus haben diese Studien auch gezeigt, dass Transformanten sehr genau über viele Generationen hinweg untersucht werden müssen, um echte ¿Knockout¿-Mutanten, bei denen ein für ein bestimmtes variables Protein kodierendes Gen irreversibel inaktiviert ist, von phasenvarianten Klonen, die die Expression des gesuchten variablen Proteins nur ausgeschaltet haben, unterscheiden zu können.

Zentrum für Pathobiologie