Molekulare Untersuchung von präsumtiven Streptococcus uberis-Isolaten zur Verbesserung der Mastitisdiagnostik.

In Milchviehherden gelten Mastitiden als kostenintensivste Produktionserkrankung, wobei dieKenntnis des ursächlichen Agens bedeutend sein kann. Dies setzt ausreichend sensitivediagnostische Verfahren voraus, die eine zuverlässige Identifikation von Keimen ausMilchproben erkrankter Euterviertel erlauben. Streptococcus (Sc.) uberis zählt zu denrelevanten Mastitiserregern weltweit und ist mit biochemischen Methoden schwer zuerfassen, da nicht alle Stämme die charakteristischen Kriterien erfüllen. Da über eineverbesserte bakteriologische Heilungsrate für Sc. uberis-Mastitiden bei einer verlängertenantibiotischen Behandlungsdauer berichtet wird, ist eine präzise Ausdifferenzierung in derbakteriologischen Untersuchung anzuraten. Ziele der vorliegenden Arbeit waren daher einSchema für eine zuverlässige Sc. uberis-Identifikation zu entwickeln und den Einsatz einesSelektivnährmediums (Modifizierter Rambachagar – MRAM), das die Produktion desEnzyms ??-d-Galactosidase anzeigt, zu evaluieren. Die Sequenzierung des 16S-rRNA-Gensdiente als Referenzmethode.Aus Viertelgemelksproben mastitiskranker Kühe wurden 336 präsumtive Sc. uberis-Isolatekryokonserviert. Die biochemische Charakterisierung gliederte diese in zwei Gruppen auf.Die erste Gruppe (n=280) umfasste anhämolysierende katalasenegative äskulinpositiveKokken, die weder ein Lancefield-Antigen noch den CAMP-Faktor aufwiesen und keinWachstum auf einem Enterokokkenmedium zeigten. Bei 91,79 % (n=257) war der ??-d-Galactosidase-Nachweis positiv. Die Sequenzierung des 16S-rRNA-Gens bestätigte 96,79 %(n=271) als Sc. uberis. Die Identifizierung durch den MRAM stimmte mit der Sequenzierungzu 94,29 % (n=264) überein. Isolate mit abweichenden biochemischen Eigenschaftenbildeten die zweite Gruppe (n=56). Von diesen Isolaten zeigten sich 66,07 % (n=37) ??-d-Galactosidase-positiv. Als Sc. uberis wurden 36 Isolate (64,29 %) bestätigt und durch dieRoutinediagnostik korrekt identifiziert. Die Ergebnisse des MRAM stimmten mit der 16SrRNA-Gensequenzierung zu 83,93 % (n=47) überein. Der Identifikationserfolg in der zweitenGruppe unterschied sich signifikant zwischen den biochemischen Methoden und MRAM.Basierend auf diesen Ergebnissen sind für die Identifizierung von Sc. uberis-Stämmen in derMastitisdiagnostik die Katalase-Reaktion, das Hämolyseverhalten auf Blutagar, dieÄskulinhydrolyse und das Wachstum auf einem Enterokokkennährmedium ausreichend.Zeigen Isolate in diesen Tests abweichende Charakteristika, erhöht der MRAM dieGenauigkeit der Sc. uberis-Identifikation.